1、电泳液的性质:主要是指电极溶液和蛋白质样品溶液的pH值、离子强度和粘度等。
(a)pH值:溶液pH值决定带电颗粒的解离程度,也即决定其带净电荷的量。对蛋白质而言,溶液的pH值离其等电点越远,则其带净电荷量就越多,从而泳动速度就越快。反之,则越慢。当pH值等于其时,净电荷为0,μ也为0。因此电泳时应选择适宜的PH值,并需采用缓冲溶液,使溶液的pH值恒定.(b)溶液粘度:泳动度与溶液粘度是成反比关系。因此,粘度过大或过小,必然影响泳动度。一般一些经验丰富的电泳师傅都知道,用手感觉一下电泳液就知道浓度是多少,以便来加油漆的多少。
2、颗粒性质:颗粒的直径、形状及所带静电荷量对泳动速度有较大影响。一般来说颗粒带净电荷量越多,或其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快。反之则越慢。
3、电渗:当支持物不是绝对惰性物质时,常常会有一些离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正离子,使靠近支持物的溶液相对带电。当颗粒的泳动方向与电渗方向一致时,则加快颗粒的泳动速度;当颗粒的泳动方向与电渗方向相反时,则降低颗粒的泳动速度。
4、离子强度:溶液的离子强度一般在0.02-0.2之间时,电泳较合适。若离子强度过高,则会降低颗粒的泳动速度。其原因是,带电颗粒能把溶液中与其电荷相反的离子吸引在自己周围形成离子扩散层。若离子强度过低,则缓冲能力差,往往会因溶液PH值变化而影响泳动的速率。